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離心是在離心力的作用下,利用離心后的樣品物質(zhì)的沉降系數(shù)、浮力和密度來分離、濃縮、提取和制備樣品,分析測(cè)定生物大分子的分子量和純度。按其工作方式可分為離心過濾、離心沉淀(或澄清)和離心分離。
離心機(jī)的設(shè)計(jì)原理是利用轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生的離心場(chǎng)力,加快樣品顆粒的沉降速度,將樣品中沉降系數(shù)不同或浮力密度不同的物質(zhì)分離。決定離心力大小的因素除了速度(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù),r/min)和離心力(轉(zhuǎn)子)的半徑外,還與顆粒所受的力(重力、浮力、摩擦力)有關(guān)。在旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)中接收。離心力 方向垂直于重力,所以常用相對(duì)離心力(rcO)。它是指相對(duì)于重力作用在旋轉(zhuǎn)粒子上的離心力。以重力加速度g(980cm/s)為取值,也稱“g-Force",表達(dá)式為:RCF=o)~/980。
離心技術(shù)的關(guān)鍵是如何根據(jù)樣品顆粒和介質(zhì)的性質(zhì)以及轉(zhuǎn)子的技術(shù)參數(shù)來確定離心力、速度和離心時(shí)間的設(shè)置。顆粒(統(tǒng)稱為細(xì)胞、細(xì)胞器和大分子)的沉降或分離速率取決于離心力、顆粒的大小、形狀和密度,以及沉降介質(zhì)的密度和粘度。根據(jù)用途、轉(zhuǎn)速和功能配置,可以使用醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的幾種類型的離心機(jī)。不同轉(zhuǎn)速的離心機(jī)產(chǎn)生的離心力不同,用途也不同。
低速機(jī)型設(shè)計(jì)為大容量(大容量離心機(jī),≥12L),主要用于細(xì)胞、血清、血漿和批次樣品的分離和制備。在生物制藥領(lǐng)域也發(fā)揮著更大的作用;
高速離心機(jī)(High speed centrifuge)主要用于某些亞細(xì)胞器結(jié)構(gòu)、核酸、蛋白質(zhì)、質(zhì)粒、細(xì)菌的分離和制備;和超速離心機(jī)(Ultracentrifuge)。 ~0 適用于病毒、核酸和蛋白質(zhì)的分離純化。進(jìn)一步的分析和研究也可以使用分析型超速離心機(jī)。
近年來,出現(xiàn)了一種“萬(wàn)能實(shí)驗(yàn)室報(bào)告"。Trifuge)"模型進(jìn)入醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室,其性能符合分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)技術(shù)的需要,受到了實(shí)驗(yàn)室工作者的廣泛關(guān)注。其特點(diǎn)是兼顧低速和高速機(jī)器。 ,微大容量性能,但體積小,重量輕,功耗低,操作方便;普通機(jī)型最高轉(zhuǎn)速≥13000r/min,個(gè)別機(jī)型超過20000r/min,啟動(dòng)轉(zhuǎn)速可低至100r/min;最大rcf一般可以達(dá)到20000~g以上,部分機(jī)型達(dá)到60000xg;最大離心能力可達(dá)3000ml